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檢出限和定量限標準做法

更新時間:2016-09-01      點擊次數(shù):6850

    檢出限(LOD)或定量限(LOQ)的測定通常是在目標物的含量在接近于零的時候才需要進行測定。

 什么時候需要進行測定?

        檢出限(LOD)或定量限(LOQ)的測定通常是在目標物的含量接近于“零”的時候才需要進行測定。當方法應(yīng)用于所測定的分析物濃度要比定量限大的多時,檢出限與定量限評定就顯的不是非常有必要了。但是對于那些濃度接近于檢出限與定量限的痕量和超痕量測試,常報出“未檢出”時,這時檢出限或定量限對于風(fēng)險評估或法規(guī)決策則就顯得非常的重要。

 

不同的基體需要獨立評估其檢出限和定量限

 檢出限(LOD)?

       對于大多數(shù)現(xiàn)代的分析方法檢出限(LOD)分為兩個部分,方法檢出限(MDL)和儀器檢出限(IDL)。。。

       方法檢出限是在應(yīng)用在某個具體基體內(nèi)的分析物的測定,可定義分析物質(zhì)能在可靠將分析物測定信號區(qū)別于特定基體背景(噪音)的zui低濃度或量。

       換句話說,方法檢出限就是方法中測定出大于相關(guān)不確定度的zui低量(Taylor,1989)。在分析方法檢出限(MDL)時需要靠考慮到所有基體的干擾。

 

方法的檢出限不應(yīng)與儀器zui低響應(yīng)值相混淆

      使用信噪比可作為考察儀器性能的一個有用的指標,但不適用于評估方法檢出限。目前大多數(shù)的分析都是利用設(shè)備進行分析,但每個設(shè)備對于所檢測的分析物的量都會有一定檢出能力。這種檢出能力可用儀器檢出限(IDL)進行表示。儀器檢出限可定義為儀器能將目標物與設(shè)備背景相區(qū)別或可靠檢測的zui低量(儀器噪音)。隨著靈敏度增加,IDL降低,儀器噪音降低,IDL也降低。

 

可多種方法確定檢出限,羅列出應(yīng)用評定檢出限的一些方法

 

1、基于虛擬(visual)評估LOD:

 Visual評估可應(yīng)用于非儀器方法和儀器分析方法,同時也可應(yīng)用于定性測試方法的評估。

 通過在樣品空白中添加已經(jīng)濃度的分析,后評定能夠可靠被檢測出的zui低濃度值。

      在樣品空白中加入一系列不同濃度的分析物。在每一個濃度點需要進行約7次的獨立測試。各個濃度點的重復(fù)性測試應(yīng)該隨機性。對于定性分析,通過繪制陽性百分比(陰性)與濃度之間的響應(yīng)曲線,檢查確定哪個濃度閾值是不可靠的。

 

2、空白標準偏差進行評定LOD

    通過分析大量的空白進行評定(推薦20個以上)。樣品空白獨立測試的次數(shù)(n大于10以上),以及加入zui低可接受濃度的樣品空白測試次數(shù)(n大于10次以上)。LOD的可用樣品空白平均值值加上3被標準偏差。(0+3S)

 

3、基于校準曲線的LOD評定

       如果LOD數(shù)據(jù)或與LOD相近的數(shù)據(jù)無法得到,則可利用校準曲線的參數(shù)進行評估。用空白加上空白的3倍偏差,儀器對于空白的響應(yīng)可用方程截距a表示,儀器響應(yīng)的標準偏差可用校準曲線的標準偏差Sy/x來表示。故可利用方程yLOD=a+3sy/x=a+bxLOD,則xLOD=3sy/x/b.這個方程廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)。然而由于這是推斷,當濃度接近于期望LOD時,則所測定的數(shù)據(jù)就會顯得不那么可靠,建議當濃度接近于LOD時,需要證明要在合適的置信區(qū)間內(nèi)能夠被測定出來(可靠的被測定出來)。

 

4、基于信噪比LOD

      由于儀器分析過程都會有背景噪音,常用的方法就是利用已經(jīng)低濃度的分析物與空白樣品的測量信號進行比較,確定出能夠可靠測定出的zui小的濃度,zui典型的可接受的信噪比是2:1或3:1。

 

定量限LOQ

       定量限同樣是指檢測限,然而定量限與LOD是有區(qū)別。類似于LOD,LOQ也可以分成兩個部分,方法定量限(MQL)和儀器定量限(IQL)

       方法定量限可定義為在特定基體中在某一可信度(a certain degree)內(nèi)對分析物能進行可靠確認和定量的zui低濃度值。

       儀器定量限可定義為儀器能夠?qū)Ψ治鑫镞M行可靠確認和定量的zui低濃度值。

       定量限可以用分析物在樣品中的濃度來表示(百分比,ppb)表示。多種慣例采用于LOQ的評估。主要是從其可信性(certainty)考慮(如測試是否基于法規(guī)目的,測試不確定度和可接受準則等),zui普遍可接受的是將空白加上10倍的重復(fù)標準作為LOQ或3倍的LOD(給出了更大的數(shù))或高于方法確認中使用zui低加標的50%作為LOQ.為了使數(shù)據(jù)更加的可信性,LOQ可用10的LOD來表示。在某一特定測試領(lǐng)域其它因素可以應(yīng)用,那么機構(gòu)應(yīng)當將那些現(xiàn)行的因素考慮在內(nèi)。

       定量限是在特定的基體和方法評估的,不同機構(gòu)之間或在同個機構(gòu)內(nèi)由于不同設(shè)備、技術(shù)和試劑不同而有差異。

 

報告檢出限LOR

     告檢出限是實際定量限或高于LOQ.   LOD-快速參考

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